合作标题：检测禽流感新城疫胶体金试纸盒
合作内容：禽病胶体金快速诊断产品说明
一．胶体金应用背景
随着世界范围内畜禽业的养殖规模不断扩大，动物传染病危害随之加剧。有效防治疾病的关键是快速准确地诊断致病原，及时采取有效的预后措施。因此畜禽养殖业亟需适宜的快速诊断试剂。我国畜禽疾病防治采取以疫苗免疫为主的综合措施，但实际生产中常出现免疫失败，导致疫病流行。因此，快速准确地检测畜禽的免疫抗体水平在疾病防治中就显得越发重要了。
随着生物技术的进步，国内外兽医专家研究开发了多种检测方法，如ELISA、Dot-ELISA、间接血凝法、病毒分离、RT-PCR、免疫荧光等方法。但是这些方法需要设备比较齐全的实验室及较高水平的专业人员操作。检测过程繁杂，检测时间较长，检测成本也偏高。在国家财政支持下，这些方法正普及到国内地区市级兽医站等单位，而那些缺少仪器设备和专门技术人员的基层兽医站及畜禽养殖场，更需要快速准确的现场诊断试剂，胶体金试纸就是最能满足用户需要的产品。
二、胶体金试纸特点
⒈加样简单，操作简便，非专业人士经过简单培训即可操作；
⒉特异性强、具备ELISA试剂同样的抗体抗原材料及反应原理，敏感性可达到ELISA水平．如果结合银染色能有更高的敏感性；
⒊单份样品即可检测，试剂和样品用量极小，可以低至1～2μL。特别适合现场检测，无需荧光显微镜和酶标检测仪等仪器，非常适合现场使用；
⒋检测时间大大缩短，试纸反应迅速，样品加入后，一般5～10分钟内即可判读结果；
⒌稳定性好，试纸产品是干法试剂，常温保存即可。没有有害物质(如放射性同位素、邻苯二胺等)的参与；
⒍多联诊断试纸，即在同一条膜上可以同时检测多种抗原（抗体），大大提高了检测效率，同时也降低了检测成本。
⒎胶体金快速检测试纸可在现场操作，容易被消费者及监督、检验部门所接受，能取得较大的经济效益和社会效益。
三、研究所简介
本所由世界禽病学会会员、韩国RapiGen生命科学研究所（特聘外籍）研究员刘会芳先生与多位长期工作在生产和科研第一线的中青年专家创办，以河北省农科院、河北农业大学、河北科技师范学院等科研院所为依托，与韩国RapiGen生命科学研究所紧密合作，利用当今国际新技术与双方共同研发的高新产品服务于我国畜牧事业，为养殖业保驾护航。研究所主要工作如下：
利用单克隆抗体（德国Koehler、丹麦Jerne和阿根廷Milstein获84年诺贝尔奖）、胶体金标技术（美国Faulk和Taylor已多次获诺贝尔奖提名）、免疫色谱学等理论。研发成功畜禽用胶体金快速诊断试纸盒。家禽主要是新城疫、禽流感并能将流感分型。其一条试纸能测多个病毒为世界首创。目前正根据我国猪病诊断的迫切需要加紧研发猪瘟、蓝耳病、圆环病毒等病毒的快速诊断试纸。另外相关病毒的抗体测定试纸盒已有部分研发成功，正在进行最后的测定工作。
针对家禽大肠杆菌病顽固、沙门氏菌病（鸡白痢伤寒）漫延、里氏杆菌（鸭浆膜炎）猖獗的情况，研究所开发成功了新的自家疫苗制造方法。新方法根除了新的疫苗副作用大的缺点，其内毒素含量仅为以前疫苗的几十分之一。新疫苗在能引起家禽体液免疫的同时，还能引起细胞免疫，为解决家禽业的老大难问题找到了新的方法。其技术为世界领先。
从事新型聚合酶扩增技术（美国Kary Mullis因发明此技术获93年诺贝尔奖）的研发和应用，与韩国合作正在研发一次能测出十到三十个病的鸡、猪、犬等畜禽的高密度和低密度基因芯片。已有部分产品出品。
针对流行疾病，应用、研发和生产相应的化学药物。研发其最佳组合和最新应用。
本企业的胶体金试纸已经在市场流通2～3年，效果较好。其产品是与韩国协作生产。主要利用的韩国的金标技术。（注：韩国的金标技术和试纸生产技术在全世界名列第一）普通的病毒检测工作要7～8天才发现病毒，但是采用试纸只需要15～20分钟即可。胶体金的行业标准目前在中国没有，所有的标准都只有在国外有，比如本所的行业标准就是韩国的，自身只有几个检测产品的质量指标。比如检测标准为0.031个血凝单位为检测标准，采用活病毒或疫苗进行产品检测。对于活病毒的检测是稀释1000～10000倍。现今胶体金的试纸生产主要集中在河南，上海和武汉。但是标记技术都不太成熟，而韩国的技术较好，但是其缺乏英文版本，需要掌握韩语的技术人员。
石家庄市神九畜禽疾病防治及药物研究所与韩国瑞捷（RAPIGEN）研究所合作并在世界上首次推出新城疫（NDV）+禽流感（AIVH1～15）、禽流感（AIVH1～15）+禽流感（AIVH5）病毒快速诊断试纸。该项目由国际上胶体金方面顶尖科学家朴在九(Jae-Ku Park)医学博士主持，可使鸡场提前5～10天探知瘟疫的侵入，在发病时能迅速判断是新城疫还是流感、是流感时又能分出是否是H5型的，解决了行业内的一大难题，非常适合中国需要。相关产品如下：
1、NDV + AIV（H1～15定性）快速诊断试纸
2、AIV（H1～15定性）+ AIV（ H5分型）快速诊断试纸
3、NDV 快速诊断试纸
4、AIV（H1～15定性）快速诊断试纸
5、AIV（ H5分型）快速诊断试纸
四、产品设计原理
禽用胶体金快速诊断试纸是利用胶体金原理和免疫层析原理来实现捕捉野毒的。
胶体金是俗称金子的金属金的水溶胶。胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
免疫层析法 (Immunochromatography)是九十年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，其原理是将单克隆抗体与胶体金结合，置于聚脂膜中；加样后，如样品中有病毒，则金标抗体与部分病毒结合在毛细现象的作用下向上流动，遇到固定在硝酸纤维膜上的抗体时便生成“金标抗体/抗原/抗体”夹心免疫复合物从而聚集显色（检测线阳性），另一部分没与抗体结合的金标抗体与病毒结合物和随液体向上流动，遇抗抗体时形成“抗抗体/金标抗体/抗原”复合物显色（质控线）；当样本中不含病毒时，则不形成“金标抗体/抗原/抗体”夹心免疫复合物不显色（检测线阴性），但抗抗体与金标抗体复合物仍显色（质控线），从而实现特异性的免疫诊断。该技术与以往常规诊断方法相比具有以下突出优点
• 快速：全部检测过程仅需 5～30分钟。
• 准确：比酶联免疫吸附测定（ELISA其设备5万元）准确度高，与聚合酶扩增技术（PCR其设备百万元）相近。
• 简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，可随时随地进行,也不需要专业临检人员操作，而且携带方便，基层可以开展。
• 稳定性好：金标试剂稳定，2~30℃可长期保存。
• 检测标本种类多：泄殖腔内容物、粪便、气管粘液等。
五、 产品模式图
图二 rapid test 模式图
图三 结构图：
反应模式图：(以人的HCG为例)
六、产品参数及使用
1、禽流感病毒（AIV）+新城疫病毒（NDV）联合抗原检测试纸
•检测：所有禽流感含H1~15所有亚型和新城疫病毒（包含大量变异株）。
•检测
发布时间：2009/3/2 11:47:00 |
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